光学显微镜的重要参数有那些

光学显微镜的重要参数主要包括以下几个方面：

1. 放大倍数

定义：物体经过显微镜成像后放大的比例。

计算公式：总放大倍数 = 目镜放大倍数 × 物镜放大倍数。

影响因素：虽然放大倍数越高，观察到的物体细节就越多，但过高的放大倍数也可能造成图像失真或模糊。因此，使用时应根据观察需求和样本特性选择合适的放大倍数。

2. 数值孔径（NA）

定义：一个无量纲数，用于衡量光学系统收集光的能力，具体描述了透镜收光锥角的大小。

计算公式：NA = n × sin(α/2)，其中n为透镜与被检物体之间介质的折射率，α为孔径角（透镜光轴上的物体点与物镜前透镜的有效直径所形成的角度）的一半。

影响因素：物镜结构与设计、介质折射率、光源波长、光学特性以及观察对象的形状大小等都会影响数值孔径的大小。数值孔径越大，显微镜的分辨率、对比度和亮度等性能就越好。

3. 分辨率

定义：显微镜能清晰区分的两个物点的Z小间距，又称鉴别率，它反映了显微镜对细节进行区分的能力。

计算公式：σ = λ/NA，其中σ为Z小分辨距离，λ为光线的波长，NA为物镜的数值孔径。

影响因素：分辨率受到物镜的数值孔径和照明光源的波长的影响。要提高分辨率，可以采取降低波长λ值、增大介质n值以提高NA值、增大孔径角α值以提高NA值等措施。

4. 视场

定义：从显微镜中能看到的圆形范围，也叫视野。它代表着显微镜能够观察到的Z大范围。

影响因素：视场数（FN）越大，观察范围越广。视场数与目镜和物镜的放大倍数息息相关，目镜和物镜放大倍数越大，视场数通常越小。因此，需根据目镜和物镜的组合来选择合适的视场数，以获得Z佳观察效果。同时，分辨率与视场数之间存在平衡关系，选择时应以保证分辨率为准。

5. 景深

定义：在显微镜观察和拍摄样品时，从对准焦点的位置开始，改变物镜与样品表面距离时，对焦能保持清晰的范围。

影响因素：景深大小决定了显微镜观察时，能在多大范围内保持图像的清晰度。景深大时，可以看到被检物体的全层；景深小时，则只能看到被检物体的一薄层。景深与总放大倍数及物镜的数值孔径成反比。

6. 工作距离

定义：试样调准焦点时，物镜前缘与试样表面（或盖玻片顶面）的距离。

影响因素：工作距离的大小主要取决于物镜的参数。在选择物镜时，需要考虑工作距离的需求，以确保显微镜能够满足特定的观察要求。长工作距离物镜焦距大于普通物镜，专为液态材料、液晶、组织培养等镜检设计，允许在不接触容器的情况下观察和研究样本。

这些参数在使用光学显微镜时都非常重要，它们之间相互联系又相互制约。因此，在实际应用中，需要根据具体的观察需求和样本特性来协调这些参数的关系，以获得Z佳的观察效果。